el alimno tecnico laboratorista aprendera a elaborar un reactivo denomminado medio de cultivo,en el que se centran datos de las 3 unidades por lo que sus conocimientos seran aplicados en los modulos y submodulos de la especilidad correspondiente y de preferencia en microbiologia y bacteriologia.
introduccion:
las actividades practicas se llevan acavo dentro del laboratorio clinico donde se concentran todos los conocimientos obtenidos en la teoria para que con el aprendisaje por descubrimiento implicando las competencias genericas de el alumno tendra un egreso satisfactorio co los conocimientos obtenmidos que le facilitaran la su estancia a nivel profecional y laboral.
cuadro teorico:
en este se llevan acavo todos los datos referentes a la elaboracion de un producto que se apolla en las 3 etapas denominadas preanalitica, analitica y post analitivca. Lo que al termino de las 3 etapas se tiene como resultado un producto que es utilizado en la imvestigacion practica cientifica y ademas bibliografica.
Materiales:
1-matraz erlenmeyer
2-probeta graduada
3-vaso de presipitado
4-barilla agitadora
5-cuatro cajas petri
6-vidrio de reloj
7-balanza granataria
8-agua destilada
9-encendedor
10-2 mecheros buncen
11-espatula
12-guantes de temperatura
13-torundas de algodon
14-gasas esteril 10x10
15-masquet tape
16-hoja de laboratorio
17-materiales de apoyo (autoclave)
18-papel secante
19-papel cubre mesa
Desarrollo:
primero nos pusimos esl equipo de bioseguridad completo, vestimos la mesa y uvicamos en el centro los materiales que utilizariamos.
hicimos las operaciones para poder determinar cuantos gr. de AGAR MAC CONKEY necesitavamos para 80 ml de solucion salina.Pesamos el vidrio de reloj vacio y con los 4 gr. que se necesitan.
metimos los 4 gr. al matraz erlenmeyer y los 8o ml de solucion los revolvimos, lo dejamos reposar por un minuto. con los mecheros de bunsen lo agitamos hasta el punto de herbor, se dejo reposar un minuto y fue cellado y etiquetado para llevarlo a la autoclave.
se dejo 20 minutos en la autoclave, despues introducimos 20 ml de la solucion a cada caja petri . se dejaron las cajas petri semi abiertas esperando que se solidificaran .cuando se solidificaron se cerradon y flamearon con el mechero bunsen.
AGAR MAC CONKEY
El Agar MacConkey es un medio selectivo y diferencial recomendado para el cultivo y aislamiento de microorganismos Gram negativos a partir de muestras clínicas, de alimentos, agua, productos lácteos y productos farmacéuticos. En este medio se aislan y diferencían bacilos entéricos Gram negativos fermentadores y no fermentadores de la lactosa.
El Agar MacConkey en su fórmula original fue utilizado para diferenciar cepas de Salmonella typhosa de otros miembros del grupo coliforme. La fórmula fue modificada para mejorar el crecimiento de cepas deSalmonella y Shigella y con ello también se mejoraron las reacciones diferenciales entre los microorganismos patógenos entéricos y el grupo coliforme.
El Agar MacConkey contiene cristal violeta y sales biliares como inhibidores de organismos Gram positivos. Las colonias aisladas de bacterias que fermentan la lactosa son rosadas y pueden estar rodeadas de una zona de precipitado de sales biliares el cual es debido a una caída en el pH por la fermentación de la Lactosa.
AGAR EOSINA Y AZUL DE METILENO
El Agar Eosina y Azul de Metileno es un medio utilizado para el aislamiento y diferenciación de bacilos entéricos Gram negativos. Este medio también es conocido como Agar EMB por sus siglas en inglés.
La fórmula original del Agar EMB fue desarrollada por Holt-Harris y Teague. El uso de la eosina y del azul de metileno permite la diferenciación de las colonias fermentadoras de lactosa de las no fermentadoras. La sacarosa está incluida en el medio para detectar a los miembros del grupo coliforme que fermentan más rápidamente la sacarosa que la lactosa. Este medio se considera superior al Agar ENDO, ya que resulta ser un medio más sensible, estable y seguro y permite una diferenciación mas temprana entre las colonias fermentadoras y no fermentadoras de lactos
AGAR NUTRITIVO
El Agar Nutritivo es utilizado para el cultivo de una amplia variedad de microorganismos. A principios de 1900 la APHA (American Public Health Association) sugirió esta formulación como un medio de cultivo estándar para el análisis de agua. El Agar Nutritivo se encuentra descrito en los Métodos Estándar de la APHA y de la AOAC (Association of Oficial Analytical Chemists) para el análisis de agua, leche y sus derivados, alimentos y otros materiales.
El Agar Nutritivo sigue siendo un medio ampliamente utilizado para el cultivo de microorganismos no fastidiosos.
AGAR DEXTROSA SABOURAUD
El Agar Dextrosa Sabouraud es un medio utilizado para el cultivo de hongos y levaduras.
El Agar de Dextrosa Sabouraud es una modificación a la fórmula original del Agar de Dextrosa desarrollado por Raymand Sabouraud. Este medio es utilizado para el cultivo de hongos patógenos, particularmente de aquellos asociados con infecciones de piel. La alta concentración de dextrosa y la acidez del pH hacen a éste un medio selectivo para hongos. Con la adición de cicloheximida, estreptomicina y penicilina, se obtiene un excelente medio para el aislamiento primario de dermatofitos. Este medio es también utilizado para la determinación microbiológica en cosméticos y para evaluar la presencia de hongos en alimentos. En este medio las peptonas proveen la fuente de carbono y nitrógeno para el crecimiento de los microorganismos, la dextrosa actúa como fuente de energía y el agar es agregado como agente solidificante.
AGAR HIERRO DE KLIGER
El Agar Hierro de Kligler es un medio empleado para la diferenciación de cultivos puros de bacilos Gram negativos en base a su capacidad para fermentar la dextrosa y la lactosa y a la producción de sulfuro de hidrógeno. El Agar Hierro de Kligler es una modificación de la fórmula original de Kligler que era un medio con bajos nutrientes, dextrosa, indicador de Andrade y acetato de plomo. Russell trabajó con un medio con dextrosa, lactosa y un indicador de pH para la diferenciación de bacilos Gram negativos fermentadores y no fermentadores de lactosa. Kligler encontró que el acetato de plomo usado para la detección del sulfuro de hidrógeno, podrìa dar mejores resultados combinado con el medio de dos azucares de Russell para la diferenciación de los grupos tifoídico, paratifoídico y disentérico.
MEDIO MIO
El Medio MIO es utilizado para la diferenciación de enterobacterias en base a su movilidad, capacidad para descarboxilar la lisina y la producción de indol. Este medio también es conocido como Medio para Movilidad Indol y Ornitina.
Edered y Clark así como Oberhofer y Hajkowsky desarrollaron el Medio MIO para poder observar las reacciones de movilidad, producción de indol y descarboxilación de la lisina simultáneamente. Estas reacciones son determinantes para la identificación de enterobacterias. En este medio las peptonas proporcionan la fuente de carbono y nitrógeno. El extracto de levadura provee las vitaminas y cofactores requeridos para el desarrollo. La dextrosa proporciona la fuente de energía. El agar es adicionado para demostrar la movilidad. El púrpura de bromocresol actúa como indicador de cambios de pH facilitando la detección de la descarboxilación de la lisina.
Bibliografia:
http://www.mcd.com.mx/pdfs/AGAR%20MAC%20CONKEY.pdf
http://www.mcd.com.mx/pdfs/AGAR%20EOSINA%20Y%20AZUL%20DE%20METILENO.pdf
http://www.mcd.com.mx/pdfs/AGAR%20NUTRITIVO.pdf
http://www.mcd.com.mx/pdfs/AGAR%20DEXTROSA%20SABORAUD.pdf
http://www.mcd.com.mx/pdfs/medio_mio.pdf
http://www.mcd.com.mx/pdfs/agar_hierro_kliger.pdf
